液質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS)又叫液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術,它以液相色譜作為分離系統(tǒng),質(zhì)譜為檢測系統(tǒng)。樣品在質(zhì)譜部分和流動相分離,被離子化后,經(jīng)質(zhì)譜的質(zhì)量分析器將離子碎片按質(zhì)量數(shù)分開,經(jīng)檢測器得到質(zhì)譜圖。液質(zhì)聯(lián)用體現(xiàn)了色譜和質(zhì)譜優(yōu)勢的互補,將色譜對復雜樣品的高分離能力,與MS具有高選擇性、高靈敏度及能夠提供相對分子質(zhì)量與結(jié)構(gòu)信息的優(yōu)點結(jié)合起來,在藥物分析、食品分析和環(huán)境分析等許多領域得到了廣泛的應用。
一、質(zhì)譜儀工作環(huán)境要求:①周圍無強烈震蕩源及電磁感應裝置;②電源要求接地交流電;③室溫要求15~28℃;④相對濕度要求20%~80%。
使用過程中要特別注意室內(nèi)溫度和濕度的控制。一般沒有外置飛行管的飛行時間質(zhì)譜對環(huán)境的要求更嚴格,外部環(huán)境會直接影響質(zhì)量軸的準確性。質(zhì)譜儀采用兩級抽氣結(jié)構(gòu),前級為機械泵,后級為分子渦輪泵工作時先由前級泵,將真空腔內(nèi)的壓強降低幾個數(shù)量級,再由后級泵降至工作所需壓強。
二、使用要求:1.開機:
質(zhì)譜儀的開機首先開氣,再開機械泵,再打開質(zhì)譜儀的電源,等真空度達到后再開啟分子渦輪泵,等真空度達到后才可以進行調(diào)諧校正,一般至少需要抽12個小時才能達到。每次開機后都需要校正后才能使用質(zhì)譜儀。
三、液質(zhì)日常定期維護
1、使用的穩(wěn)壓電源UPS,保證儀器電源電壓穩(wěn)定持續(xù)(特別是停電時對儀器的影響)。
2、每天用異丙醇溶液沖洗系統(tǒng)和清潔霧化室,定期開震氣閥震氣(對于ESI源,至少每星期做一次;對于APCI源,每天做一次),保證毛細管潔凈。
3、流動相流速不要過高,ESI離子源不要超過0.5ml/min,APCI不要超過1.0ml/min。
4、機械泵的泵油需要定期更換,一般半年更換一次,如果泵油看起來很臟,需要提前更換。更換泵油的時候需要將泵油全部倒出,再更換新的泵油,不同品牌的泵油不能混用。一般實驗室的質(zhì)譜儀都會在長假的時候進行大的維護。
5、控制好樣品運行的環(huán)境,包括溫度和濕度。6、實驗完畢后要清洗進樣針、進樣閥等,用過含酸的流動相后,色譜柱和離子源都要用甲醇/水沖洗。7、定期清洗樣品錐孔,關閉隔斷閥,取下樣品錐孔,先用甲醇:水:甲酸(45:45:10)的溶液超聲清洗10分鐘,然后在分別用超純水和甲醇各溶液超聲清洗10分鐘,待晾干后再安裝到儀器上。8、流動相要現(xiàn)用現(xiàn)配,最好不要過夜,一定要新鮮。9、定期更換電子倍增器。
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