氣質聯(lián)用儀/液質聯(lián)用儀的定量方法研究
質譜信號的強度=粒子總數(shù) x 離子化效率（就是你說的離子化難易程度）
采用一系列方法測定或者至少能夠固定（以LCMSMS為例，就是優(yōu)化電壓，噴霧角度，流動相組成比例，三氣的流量，基質的組成全部固定下來）特定方式下的離子化效率，質譜是可以用于定量的。
舉個例子，調諧好系統(tǒng)之后，你噴入1ppb的利血平溶液，得到的信號為一萬；再噴入10ppb的利血平得到的信號為十萬。然后你噴入未知濃度的利血平，發(fā)現(xiàn)其信號值為五萬，你就可以認為未知濃度的利血平為5ppb。
質譜的定量和紫外檢測器，蒸發(fā)光檢測器沒什么本質區(qū)別，只不過質譜的線性范圍比較令人抓狂而已。當然還有一系列的問題，比如說特別是很多生物分析的樣品，你稀釋十倍之后很可能質譜信號的強度不會下降十倍。1ppm對應的離子計數(shù)為一萬，0.1ppm對應的離子計數(shù)不是一千而很可能是五千三千。
任何物理量的定量過程都無非是和“尺子”去對比，質譜分析當然也不例外。要實現(xiàn)質譜定量分析一般有兩種方法。
1外標法
將待測物質A的標準品（特點是純度非常高，有時也可稱之為該物質的純品）用某種有機溶劑S稀釋成不同的濃度的標準溶液，分別取等量（一般是等體積）的這些不同濃度的標準溶液進行質譜分析。由此可以得到一組樣品量和信號值一一對應的數(shù)據(jù)，以其繪制成的曲線稱為標準曲線?，F(xiàn)在就有了一把還不錯的尺子，然后就可以去拿要檢測的實際樣品R進行質譜分析了。根據(jù)標準曲線就可以由得到的信號值去反推物質A在該實際樣品R中的含量了。
2內標法
將已知量待測物質A的同位素標記物I摻雜到實際樣品中去，然后進行質譜分析。同位素標記物一般是利用H原子的同位素氘，即A里面的H在其同位素里都換成了氘，這樣通過A的化學式就能推算出，A和I的質譜峰的差別也就知道了。根據(jù)兩者信號的比值和I的實際摻雜量就能推算出A的質量。為什么選擇同位素標記物進行標定呢？原因就是因為兩者之間的各種物理和化學屬性非常接近，除了分子量的差別幾乎可以認為一模一樣，因此就可以排除由于樣品中基質的干擾（離子抑制之類的）引起的誤差。值得一提的是這種情況在外標法里是無法避免的。
當然實際上為了簡化流程或者實在是不好找同位素標記物（實際上有大量的同位素標記物可以買到），或者節(jié)省成本以及其他原因，往往采用其他不是同位素的物質做標記物，當然標準還是要往物性相似上去貼的。這樣做出的定量結果，在一定程度上也是可以接受的。
按理說保持完整性還得分析個優(yōu)缺點，不過今天不想分析了，不能為了科普不干正事了。真是這一行的各位，直接去找本教材看看吧，都是常識。
質譜信號強度與待分析物含量的關系
任何定量分析方法都需要建立實驗測量信號與待分析物的量的關系。很幸運的是，在質譜中，通常也可以建立這樣的關系，因此質譜信號是可以用于定量的。從題主的說明來看，Ta的疑惑主要在這里。
既然問題是“質譜是怎樣做到定量的？”，我們不妨把質譜信號的產生按時間順序粗略分為三個步驟，即離子的產生，傳輸與檢測。
產生離子時，不同樣品分子的電離通常是相互獨立的。因此樣品量越多，其產生的離子也就越多。目前常用的各種離子化方法（EI、ICP、ESI、MALDI等）在實驗中（嚴格來說僅在一定濃度范圍內——術語是動態(tài)范圍，dynamic range）都至少滿足樣品量與產生離子量的正相關，一般情況下也可以進一步近似成線性相關。
傳輸離子時，簡單來說可以認為傳輸效率與被傳輸離子的量無關；（嚴格地說，被傳輸?shù)碾x子太多時，相同電荷的互相排斥會造成離子束的“體積”變大，導致傳輸效率下降。這種影響在空間有限的離子阱中表現(xiàn)得更加明顯，因此在離子阱質譜中一個重要的技術就是適當控制進入儀器的離子數(shù)量，使其既不太少也不太多。）
檢測離子時，不論是使用光電倍增管的檢測器，還是檢測鏡像電流的檢測器（ICR/Oribtrap），其信號強度（在一定范圍內）均與離子數(shù)量大致線性相關。
廢話幾句，可能會使題主感覺質譜不能定量的原因之一是，我們看到的質譜圖常用相對強度作為縱坐標，即0-100%強峰，而不展示信號的絕對強度。但在做質譜的時候，儀器記錄的當然是絕對強度（相對強度也是通過絕對強度換算出來的）。我們需要用絕對強度來定量時，就需要這部分平時不常看的信息了。
另外，在談到色譜-質譜聯(lián)用方法時，待分析物與實驗測量信號的關系之中又多了一層色譜，即待分析物含量->色譜流出物中樣品含量->質譜信號。與EI譜圖分析以相對強度為主不同，在色譜-質譜聯(lián)用時，信號的絕對強度就成了我們天天都要關心的內容，因為質譜信號強度隨時間的變化就是實驗的色譜圖，通常以總離子強度或者某一特定質荷比離子的強度作圖。
1定量的兩種方法
說過了為什么質譜可以定量，下面我們來看看具體的定量方法。常用的定量方法有兩種，外標法與內標法。
用已知量的標準樣品A和未知量的待測樣品A分別進行實驗；我們會得到以下三個信息：標準樣品的量（已知）；標準樣品的信號強度；待測樣品的信號強度。（假設樣品的響應=常數(shù)*濃度，從這三個信息即可算出待測樣品的量。）
為了更加精確地測定未知量的樣品，我們希望標準樣品的信號強度與待測樣品的信號強度盡量接近（以減少非線性響應的影響）。因此常用的外標法會測量一系列已知量的標準樣品，繪制一條工作曲線，再用擬合的方法確定未知樣的量。
內標法
外標法主要有以下兩方面的局限：1標樣和待測樣是獨立進行實驗的，實驗間的偶然誤差無法消除；2標樣和待測樣的基質（即除待分析物外的其它成分）不同，基質有可能會帶來不同的影響，也會產生誤差。
那么，如果我們把已知量的標準樣品B直接加入待測樣品A，就可以把標準樣品和未知樣品的測定在同一次實驗和同樣基質中完成，也就消除了兩次實驗和基質不同造成的誤差，這就是內標法。
（如果加入的標準樣品和待測樣品是同種物質A，那么由于它們不可區(qū)分，只通過一次實驗是不能定量待測樣的，這時我們在加入標樣前后分別進行兩次測量，即測量待測樣及待測樣+標樣的信號，即可計算出待測樣的量。）
2質譜相關的特殊定量細節(jié)
同位素稀釋
前面內標法的介紹中我們可以發(fā)現(xiàn)，理想的內標物既要和待測樣相同（具有相同的響應系數(shù)）又要不同（儀器可以區(qū)分二者的信號），這對矛盾的集合體就是同位素內標。
由于不同同位素的化合物具有近似相同的物理化學性質，離子化時的響應通常也是相同的，而它們具有不同的質荷比m/z，即可在質譜中被區(qū)分出來。因此同位素標準品是理想的內標物。
另外，由于某些元素的天然同位素分布有一定的比例，當我們加入一定量的同位素內標時，可以把對信號絕對強度的測量轉化為對信號相對比例的測量，從而提高實驗的準確性。
選擇反應監(jiān)測
在不太復雜的體系中，我們只要按照分子量就可以定性某種化合物了。但對于復雜混合物（如石油產品/生物樣品）而言，很多化合物具有相同或相近的質量（同分異構體質量完全相同，有些化合物分子量非常接近，如CO和N2，要考慮儀器的質量分辨率是否能區(qū)分二者），此時僅靠測量質量就不能確定這個化合物是否就是我們關心的“the one”了。
在串聯(lián)質譜 (Tandem MS) 儀器中，我們不僅可以把質譜儀理解為一個稱量離子的“天平”，它還具有了離子“鑷子”（選擇某個特定的離子把它分離出來）和“剪刀”（把某個/某些離子激活并打成碎片）的功能。
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